熒光顯微�(Fluorescence microscope) � 熒光顯微鏡是以紫外線�光源� 用以照射被檢物體� 使之�(fā)出熒�� 然后在顯微鏡下觀察物體的形狀及其所在位置。熒光顯微鏡用于研究細胞�(nèi)物質(zhì)的吸�、運�、化�(xué)物質(zhì)的分布及定位�� 細胞中有些物�(zhì),如葉綠素等,受紫外線照射后可發(fā)熒光;另有一些物�(zhì)本身雖不能發(fā)熒光,但如果用熒光染料或熒光抗體染色后,�(jīng)紫外線照射亦可發(fā)熒光,熒光顯微鏡就是對這類物質(zhì)進行定性和定量研究的工具之一�
1.廣角目鏡
2.消色差物�
3.四孔物鏡�(zhuǎn)換器
4.落射熒光裝置 �(B) �(G) 激�(fā)系統(tǒng) 100W汞燈
5.同軸粗微動調(diào)焦機�(gòu)� �(diào)焦范� 15毫米 微動格� 0.002毫米
6.雙層機械工作�
縱向移動范圍� 70毫米 橫向移動范圍� 50毫米
?。ㄒ唬┹d玻片
載玻片厚度應(yīng)�0.8�1.2mm之間,太厚的坡片,一方面光吸收多,另一方面不能使激�(fā)光在標本上聚�。載玻片必須光潔,厚度均�,無明顯自發(fā)熒光。有時需用石英玻璃載玻片�
?。ǘ┥w玻片
蓋玻片厚度在0.17mm左右,光潔。為了加強激�(fā)�,也可用干涉蓋玻�,這是一種特制的表面鍍有若干層對不同波長的光起不同干涉作用的物質(zhì)(如氟化鎂)的蓋玻片,它可以使熒光順利通過,而反射激�(fā)�,這種反射的激�(fā)光女可激�(fā)標本�
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組織切片或其他標本不能太厚,如太厚激�(fā)光大部分消耗在標本下部,而物鏡直接觀察到的上部不充分激�(fā)。另外,細胞重迭或雜�(zhì)掩蓋,影響判��
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封裱劑常用甘�,必須無自發(fā)熒光,無色透明,熒光的亮度在pH8.5�9.5時較�,不易很快褪去。所�,常用甘油和0.5mol/l pH9.0�9.5的碳酸鹽緩沖液的等量混合液作封裱��
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一般暗視野熒光顯微鏡和用油鏡觀察標本時,必須使用鏡�,使用特制的無熒光鏡�,也可用上述甘油代替,液體石蠟也可用,只是折光率較低,對圖像�(zhì)量略有影��
熒光顯微鏡是利用一個高�(fā)光效率的點光源,�(jīng)過濾色系�(tǒng)�(fā)出一定波長的�(如紫外光3650入或紫藍�4200�)作為激�(fā)�、激�(fā)標本�(nèi)的熒光物�(zhì)�(fā)射出各種不同顏色的熒光后,再通過物鏡和目鏡的放大進行觀�。這樣在強烈的對襯背景�,即使熒光很微弱也易辨認,敏感性高,主要用于細胞結(jié)�(gòu)和功能以及化�(xué)成分等的研究。熒光顯微鏡的基本構(gòu)造是由普通光�(xué)顯微鏡加上一些附�(如熒光光�、激�(fā)濾片、雙色束分離器和阻斷濾片�)的基�(chǔ)上組成的。熒光光源——般采用超高壓汞�(50一200W),它可發(fā)出各種波長的�,但每種熒光物質(zhì)都有一個產(chǎn)生最強熒光的激�(fā)光波長,所以需加用激�(fā)濾片(一般有紫外、紫色、藍色和綠色激�(fā)濾片�,僅使一定波長的激�(fā)光透過照射到標本上,而將其他光都吸收掉。每種物�(zhì)被激�(fā)光照射后,在極短時間�(nèi)�(fā)射出較照射波長更長的可見熒光。熒光具有專一性,一般都比激�(fā)光弱,為能觀察到專一的熒�,在物鏡后面需加阻�(或壓�)濾光片。它的作用有二:一是吸收和阻擋激�(fā)光進入目鏡、以免于擾熒光和損傷眼睛,二是選擇并讓特異的熒光透過,表�(xiàn)出專一的熒光色�。兩種濾光片必須選擇配合使用�
1.照明方式通常為落射式,即光源通過物鏡投射于樣品上�
2.光源為紫外光,波長較�,分辨力高于普通顯微鏡�
3.有兩個特殊的濾光�,光源前的用以濾除可見光,目鏡和物鏡之間的用于濾除紫外線,用以保護人��
熒光顯微鏡也是光�(xué)顯微鏡的一�,主要的區(qū)別是二者的激�(fā)波長不同。由此決定了熒光顯微鏡與普通光�(xué)顯微鏡結(jié)�(gòu)和使用方法上的不��
熒光顯微鏡是免疫熒光細胞化學(xué)的基本工�。它是由光源、濾板系�(tǒng)和光�(xué)系統(tǒng)等主要部件組�。是利用一定波長的光激�(fā)標本�(fā)射熒�,通過物鏡和目鏡系�(tǒng)放大以觀察標本的熒光圖像�
維庫電子�,電子知�,一查百��
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