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電泳技�(shù)
閱讀�16989�(shí)間:2011-07-07 16:38:30

  電泳技�(shù)是一種高技�(shù)、高要求、高裝飾性的底層防腐處理工序。它是在外加電場(chǎng)的作用下,使分離于電泳液中的涂料微粒定向遷移并沉積于電極之一的工件表面形成保�(hù)性的涂層。目前電泳技�(shù)已被廣泛�(yīng)用于蛋白�(zhì)、核酸和氨基酸等物質(zhì)的分離和鑒定�

�(fā)展歷�

  早期�電泳技�(shù)是由瑞典Uppsala大學(xué)物理化學(xué)系Svedberg教授提出了荷電的膠體顆粒在電�(chǎng)中移�(dòng)的現(xiàn)象稱(chēng)其為電泳(electrophoresis)�

  �1937�,收Arne Tiselius教授---諾貝爾獎(jiǎng)金獲得者,利用些電泳現(xiàn)�,發(fā)明了最早期的界面電泳(moving boundary�,用于蛋白質(zhì)分離的研�,開(kāi)�(chuàng)了電泳技�(shù)的新紀(jì)�。此�,各種電泳技�(shù)及儀器相繼問(wèn)�,先�(jìn)�電泳儀和電泳技�(shù)的不斷發(fā)展,使它在生物化�(xué)�(shí)�(yàn)技�(shù)中占重要地位�

種類(lèi)

  電泳技�(shù)以支持物分,可分為:紙電�,醋酸纖維素薄膜電泳,淀粉凝膠電泳,瓊脂(糖)凝膠電泳及聚丙烯酰胺凝膠電泳等。經(jīng)凝膠形狀分有水平平板電泳,園�(pán)柱狀電泳及垂直平板電泳。各種類(lèi)型的電泳技�(shù)概括如下�

  須用支持體的電泳技�(shù)�、紙上電泳術(shù)�2、醋酸纖維薄膜電��3、薄層電泳,4、非凝膠性支持體區(qū)帶電�(支持體有:淀�、纖維素�、玻璃粉、硅膠等)�5、凝膝支持體區(qū)帶電泳:①淀粉液、②、聚丙烯酰胺凝膝�、瓊�(�)凝膠�

  不用支持體的電泳�1、Tiseliuse或微量電泳技�(shù)�2、顯微電泳,3、等電點(diǎn)聚焦電泳技�(shù)�4、等速電泳技�(shù)�5、密度梯度電��

原理

  在電�(chǎng)�,推�(dòng)帶電�(zhì)�(diǎn)�(yùn)�(dòng)的力(F)等于質(zhì)�(diǎn)所帶凈電荷量(Q)與電場(chǎng)�(qiáng)度(E)的乘積。F=QE�(zhì)�(diǎn)的前移同樣要受到阻力(F)的影響,對(duì)于一�(gè)球形�(zhì)�(diǎn),服從Stoke定律,即:F′=6πrην式中r為質(zhì)�(diǎn)半徑,η為介質(zhì)粘度,ν為�(zhì)�(diǎn)移動(dòng)速度。當(dāng)�(zhì)�(diǎn)在電�(chǎng)中作�(wěn)定運(yùn)�(dòng)�(shí):F=F′即QE�6πrην�

  從上式可�(jiàn),球形質(zhì)�(diǎn)的遷移率,首先取決于自身狀�(tài),即與所帶電量成正比,與其半徑及介質(zhì)粘度成反�。除了自身狀�(tài)的因素外,電泳體系中其它因素也影響質(zhì)�(diǎn)的電泳遷移率�

作用

  1� 正確解釋電泳�(jié)果,有助于臨床疾病判斷的參�

  2� 電泳技�(shù)與免疫技�(shù)相結(jié)�,大大擴(kuò)大了其臨床應(yīng)用的范圍

  3� 電泳技�(shù)�(jìn)行同工酶譜分�,提高診斷率

  4� �(jié)合酶免疫�(biāo)記抗體技�(shù),檢�(cè)腦脊液內(nèi)寡克隆區(qū)�

  5� 利用固相�(nèi)抗原、抗體反�(yīng)分離脂蛋�

  6� 按分子量大小�(jìn)行非濃縮尿蛋白電�,區(qū)分尿蛋白�(lèi)�

�(yīng)�

  各類(lèi)電泳技�(shù)已經(jīng)廣泛地用于基�(chǔ)理論研究,臨床診斷及工業(yè)制造等方面。例如用醋酸纖維薄膜電泳分析血清蛋�;用瓊脂�(duì)流免疫電泳分析病人血清,為早期診斷原�(fā)性肝癌提供資�;用高壓電泳分離肽段,研究蛋白質(zhì)一�(jí)�(jié)�(gòu);用高壓電泳和層析結(jié)合研究核酸的一�(jí)�(jié)�(gòu)。凝膠龜泳技�(shù)在分離分析酶。蛋白質(zhì),核酸等生物大分子方面具有較高的分辯力,為生物化�(xué),分子生物學(xué)的發(fā)展作出了重大貢獻(xiàn)�

 

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