分光光度�是通過測定被測物質(zhì)在特定波長處或一定波長范圍內(nèi)光的吸收度,對該物質(zhì)進行定性和定量分析的測量儀。它主要�光源、單色器、樣品室、檢測器、信�處理�和顯示與存儲系統(tǒng)組成。目前,它已�(jīng)成為�(xiàn)代分子生物實驗室常規(guī)儀�,常用于核酸,蛋白定量以及細菌生長濃度的定量�
1、采用高性能�(yōu)�(zhì)光柵,波長精度更高;
2、采用進口鎢燈,發(fā)光效率高,使用壽命長,功耗降��
3、超大規(guī)模集�,T/A�(zhuǎn)換精度高,穩(wěn)定性高�
4、微機系�(tǒng)的應(yīng)用,使操作使用簡單可��
分光光度計采用一個可以產(chǎn)生多個波長的光源,通過系列分光裝置,從而產(chǎn)生特定波長的光源,光源透過測試的樣品后,部分光源被吸收,計算樣品的吸光�,從而轉(zhuǎn)化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比�
比色杯是分光光度計的重要配件,比色杯按照材質(zhì)大致分為石英杯、玻璃杯以及塑料�。根�(jù)不同的測量體積,有比色杯和毛細比色杯�。一般測試核酸和紫外定量蛋白,均采用石英杯或者玻璃杯,但是不適合比色法測�。因為反�(yīng)中的染料(如考馬斯亮蘭)能讓石英和玻璃著色,所以必須采用一次性的塑料�。而塑料杯一般不適合用于在紫外范圍內(nèi)測試樣品�
�722型分光光度計為例,來介紹分光光度計的使用方法�
?�?)將靈敏度旋鈕調(diào)�"1"檔(放大倍率最?�?�
�2)開啟電�,指示燈�,儀器預(yù)�20分鐘,選擇開�(guān)置于"T"
?�?)打開試樣室蓋(光門自動�(guān)閉),調(diào)節(jié)"0%T"旋鈕,使�(shù)字顯示為"00.0"�
?�?)將裝有溶液的比色皿放置比色架中�
�5)旋動儀器波長手�,把測試所需的波長調(diào)節(jié)至刻度線處�
(6) 蓋上樣品室蓋,將參比溶液比色皿置于光路,�(diào)節(jié)透過�"100%T"旋鈕,使�(shù)字顯示為"100.0T"(如果顯示不�100%T,則可適當增加靈敏度的檔�(shù),同時應(yīng)重復(fù)"3",調(diào)整儀器的"00.0"�
(7)將被測溶液置于光路�,數(shù)字表上直接讀出被測溶液的透過率(T)��
�8)吸光度A的測�,參�"3""6"�(diào)整儀器的"00.0"�"100.0",將選擇開關(guān)置于A旋動吸光度調(diào)零旋鈕,使得�(shù)字顯示為.000,然后移入被測溶液,顯示值即為試樣的吸光度A��
�9)濃度C的測�,選擇開�(guān)由A旋至C,將已標定濃度的溶液移入光路,調(diào)節(jié)濃度按鈕,使得數(shù)字顯示為標定�,將被測溶液移入光路,即可讀出相�(yīng)的濃度��
�10)儀器在使用�,應(yīng)常參照本操作方法�"3""6"進行�(diào)"00.0"�"100.0"的工作�
?�?1)每臺儀器所配套的比色皿不能與其它儀器上的比色皿單個調(diào)��
?�?2)本儀器數(shù)字顯示后背部,帶有外接插�,可輸出模擬信號,插�1腳為正,2腳為負接地線�
?�?3)如果大幅度改變測試波長�,需等數(shù)分鐘后才能正常工作。(因波長由長波向短波或短波向長波移動時,光能量變化急劇,光電管受光后響�(yīng)較慢,需一段光響應(yīng)平衡時間�
波長范圍�320�1000nm
光譜帶寬�4nm
雜散光:�0.5%(在360nm處)
波長準確度:�(yōu)于�2nm
透射比準確度:≤±1nmT
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