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凝膠排阻色譜�
閱讀�6286時間�2018-06-02 17:39:56

  排阻色譜法也稱空間排阻色譜或凝膠滲透色譜法,是一種根�(jù)試樣分子的尺寸�(jìn)行分離的色譜技�(shù)。排阻色譜的色譜柱的填料是凝�,它是一種表面惰�,含有許多不同尺寸的孔穴或立體網(wǎng)狀物質(zhì)。凝膠的孔穴僅允許直徑小于孔開度的組分分子�(jìn)�,這些孔對于流動相分子來說是相�(dāng)大的,以致流動相分子可以自由地擴(kuò)散出�。對不同大小的組分分�,可分別滲入到凝膠孔�(nèi)的不同深�,大個的組分分子可以滲入到凝膠的大孔�(nèi),但�(jìn)不了小孔甚至于完全被排斥。小個的組分分子,大孔小孔都可以滲入,甚至�(jìn)入很�,一時不易洗脫出來。因�,大的組分分子在色譜柱中停留時間較短,很快被洗脫出來,它的洗脫體積很�,小的組分分子在色譜柱中停留時間較長,洗脫體積較�,直到所有孔�(nèi)的最小分子到�(dá)柱出口,完成按分子大小而分離的洗脫過程。尺寸排阻色譜被廣泛�(yīng)用于大分子的分級,即用來分析大分子物�(zhì)相對分子�(zhì)量的分布�

目錄

簡介

  排阻色譜的固定相一般可分為軟性、半剛性和剛性凝膠三�。所謂凝膠,指含有大量液體(一般是水)的柔軟而富有彈性的物質(zhì),它是一種經(jīng)過交�(lián)而具有立體網(wǎng)狀�(jié)�(gòu)的多聚體�
 ?�?)軟性凝膠如葡聚糖凝�、瓊脂糖凝膠都具有較小的交聯(lián)�(jié)�(gòu),其微孔能吸入大量的溶劑,并能溶漲到它干體的許多�。它們適用于水溶性作流動�,一般用于小分子�(zhì)量物�(zhì)的分�,不適宜在高效液相色譜中�
 ?�?)半剛性凝膠如高交�(lián)度的聚苯乙烯。常以有�(jī)溶劑作流動相�
  �3)剛性凝膠如多孔硅膠、多孔玻璃等,它們既可用水溶性溶�,又可用有機(jī)溶劑作流動相,可在較高壓�(qiáng)和較高流速下操作�
  第九節(jié)色譜分離方法的選�
  要正確地選擇色譜分離方法,首先必須盡可能多的了解樣品的有�(guān)性質(zhì),其次必須熟悉各種色譜方法的主要特點及其�(yīng)用范圍。選擇色譜分離方法的主要根據(jù)是樣品的相對分子�(zhì)量的大小,在水中和有�(jī)溶劑中的溶解�,極性和�(wěn)定程度以及化�(xué)�(jié)�(gòu)等物理、化�(xué)性質(zhì)�
  一、相對分子質(zhì)�
  對于相對分子�(zhì)量較低(一般在200以下�,揮�(fā)性比較好,加熱又不易分解的樣品,可以選擇氣相色譜法�(jìn)行分�。相對分子質(zhì)量在200�2000的化合物,可用液固吸�、液-液分配和離子交換色譜�。相對分子質(zhì)量高�2000,則
  可用空間排阻色譜��
  �、溶解度
  水溶性樣品用離子交換色譜法和液液分配色譜�;微溶于�,但在酸或堿存在下能很好電離的化合物,也可用離子交換色譜�;油溶性樣品或相對非極性的混合�,可用液-固色譜法�
  �、化�(xué)�(jié)�(gòu)
  若樣品中包含離子型或可離子化的化合物,或者能與離子型化合物相互作用的化合物(例如配位體及有機(jī)螯合劑),可首先考慮用離子交換色�,但空間排阻和液液分配色譜也都能順利地應(yīng)用于離子化合�;異�(gòu)體的分離可用液固色譜�;具有不同官能團(tuán)的化合物、同系物可用液液分配色譜�;對于高分子聚合�,可用空間排阻色譜法�
  色譜法基本要求:
  1、掌握色譜法的分�,色譜流出曲線及有關(guān)�(shù)語;
  2、掌握色譜法的基本理�,了解柱效的影響因素�
  3、掌握分離度與柱�、選擇因子、容量因�、分析時間之間關(guān)��
  4、了解定�、定量分析方��
  5、掌握氣相色譜流程及氣相色譜儀的結(jié)�(gòu)�
  6、掌握氣相色譜固定相的特��
  7、掌握檢測器性能指標(biāo)的描述方��
  8、掌握液相色譜儀的基本結(jié)�(gòu)及基本概��
  色譜法基本要�
  9、了解液相色譜法的主要類型及固定�、流動相的選��
  10、了解色譜方法選��

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