這些有色�(chǎn)物對(duì)570nm�440nm光的吸收�(qiáng)度與洗脫出來(lái)的各氨基酸的濃度(或含量)之間的�(guān)系符合比耳定�,可與標(biāo)�(zhǔn)氨基酸比較作定性和定量�(cè)��
儀器儀� /成份分析儀� /氨基酸分析儀
指標(biāo)信息� 分辨率:THR-Ser Ile-leu �98% 保留�(shí)間重�(xiàn)性:RSD�0.5% (水解,所有峰) 峰面積重�(xiàn)性:RSD�1% (水解,所有峰)
�(cè)定原理是利用樣品各種氨基酸組分的�(jié)�(gòu)不同、酸堿�、極性及分子大小不同,在�(yáng)離子交換柱上將它們分離,采用不同pH值離子濃度的緩沖液將各氨基酸組分依次洗脫下來(lái),再逐�(gè)以另一流路的茚三酮試劑混合,然后共同流至螺旋反�(yīng)管中,于一定溫度下(通常�115�120℃)�(jìn)行顯色反�(yīng),形成在570nm有吸收的�(lán)紫色�(chǎn)�。其中的羥脯氨酸與茚三酮反應(yīng)生成黃色�(chǎn)�,其吸收�440nm�
樣品處理
�(cè)定樣品中各種游離氨基酸含量,可以除去脂肪雜質(zhì)�,直接上柱�(jìn)行分析�
�(cè)定蛋白質(zhì)的氨基酸組成�(shí)樣品必須�(jīng)酸水�,使蛋白�(zhì)完全變成氨基酸后才上柱�(jìn)行分析�
樣品分析
�(jīng)�(guò)處理后的樣品上柱�(jìn)行分�。上柱的樣品量根�(jù)所用自�(dòng)分析儀的靈敏度�(lái)確定。一般為每種氨基�0.1μmol 左右(水解樣品干重為0.3mg 左右)。測(cè)定必須在pH5�5.5�100℃下�(jìn)行,反應(yīng)�(jìn)行時(shí)間為10�15min,生成的紫色物質(zhì)�570nm 波長(zhǎng)下�(jìn)行比色測(cè)�。而生成的黃色化合物在440nm 波長(zhǎng)下�(jìn)行比色測(cè)�。做一�(gè)氨基酸全分析一般只需1h 左右,同�(shí)可將幾十�(gè)樣品一起裝入儀�,自�(dòng)按序分析,自�(dòng)�(jì)算給出精確的�(shù)�(jù)。儀器精確度在�1�3%�
�(jié)果計(jì)�
帶有�(shù)�(jù)處理�(jī)的儀�,各種氨基酸的定量結(jié)果能自動(dòng)打印出來(lái),否則,可用尺子�(cè)量峰高或用峰高乘以半峰寬確定峰面積�(jìn)而計(jì)算出氨基酸的精確含量。另�,根�(jù)峰出�(xiàn)的時(shí)間可以確定氨基酸的種�(lèi)�
�(shuō)�
� 顯色反應(yīng)用的茚三酮試�,隨著時(shí)間推移發(fā)色率�(huì)降低,故在較�(zhǎng)�(shí)間測(cè)樣過(guò)程中�(yīng)隨時(shí)采用已知濃度的氨基酸�(biāo)�(zhǔn)溶液上柱�(cè)定以檢驗(yàn)其變化情��
� 近年出現(xiàn)的采用反相色譜原理制造的氨基酸分析儀,可使蛋白質(zhì)水解出的17 種氨基酸�12min �(nèi)完成分離,且具有靈敏度高(最小檢出量可達(dá)1pmol�、重�(xiàn)性好以及一�(jī)多用等優(yōu)�(diǎn)�
(一)醫(yī)�(xué)上的�(yīng)�
■氨基酸代謝異常角度闡述了氨基酸與肝性腦病的�(guān)�
■血清中11種游離氨基酸的降低可直接影響人體組織的正常發(fā)�、生�(zhǎng)
■必需氨基酸在�(chuàng)傷愈合中的關(guān)�
� 腫瘤組織氨基酸代謝的變化�(guī)�
(二)飼料上的應(yīng)�
■質(zhì)量控�
各種飼料必需氨基酸的含量和它們之間的比例必須恰當(dāng),測(cè)定原料和�(chǎn)品中的氨基酸含量,以�(dá)到保證質(zhì)量的目的�
■真?zhèn)舞b�
�(yú)粉氨基酸組成特點(diǎn)是賴(lài)氨酸、蛋氨酸含量高,氨基酸分析結(jié)果很容易就可以辨別真?zhèn)�?BR> (三)農(nóng)�(yè)、食�、飲料及其它
■對(duì)玉米、大�、小麥等�(nóng)作物的氨基酸含量�(jìn)行檢�(cè)
� �(duì)果汁、飲料�(jìn)行真?zhèn)蔚蔫b�
■檢�(yàn)�(cè)定茶氨酸�(lái)鑒別�?zhèn)尾枞~
■對(duì)醬油�(jí)別的�(rèn)�
維庫(kù)電子通,電子知識(shí),一查百��
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